色譜柱在色譜儀分析系統中起著(zhù)分離作用，是色譜分析的核心部件。正確使用和維護色譜柱尤為重要，使用不當***會(huì )降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。以下從七個(gè)方面簡(jiǎn)答介紹液相色譜柱在使用過(guò)程中應當著(zhù)重注意的問(wèn)題。

1

避免壓力和溫度的急劇變化

溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì )影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會(huì )沖動(dòng)柱內填料，因此在調節流速時(shí)應該緩慢進(jìn)行，以保持色譜柱內填料的穩定性。

2

避免直接改變溶劑的組成

在需要改變檢測樣品溶液組成是，應逐漸改變溶劑的組成，特別是反相色譜中，不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然。且在使用次洗脫能力強?洗脫液沖洗色譜柱時(shí)，對流路系統中流動(dòng)相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡，每種流動(dòng)相的體積應是柱體積的20倍左右，即常規分析需要50~75ml。

3

避免色譜柱反沖

一般來(lái)說(shuō)色譜柱不能反沖，只有色譜柱使用說(shuō)明書(shū)上標明該柱可反沖才可以反沖除去留在柱頭上的雜質(zhì)。否則，反沖色譜柱的影響是迅速降低柱效。

4

避免流動(dòng)相使用不當而破壞固定相

選擇使用適宜的流動(dòng)相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一段預柱，分析柱是鍵合硅膠時(shí)，預柱為硅膠，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預先被硅膠"飽和"，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。

5

禁止樣品未經(jīng)處理直接進(jìn)入色譜柱

避免將基質(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內，需要對樣品進(jìn)行預處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經(jīng)常更換。

6

禁止將緩沖溶液長(cháng)時(shí)間存放在色譜柱內

保存色譜柱時(shí)應將柱內充滿(mǎn)乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。******禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過(guò)夜或更長(cháng)時(shí)間。

7

禁止色譜柱未經(jīng)處理直接封存

色譜柱使用完成之后須使用相宜溶劑進(jìn)行清潔處理，例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線(xiàn)平衡；當采用鹽緩沖溶液作流動(dòng)相時(shí)，使用完后應用無(wú)鹽流動(dòng)相沖洗；含鹵族 元素（氟、氯、溴）的化合物可能會(huì )腐蝕不銹鋼管道，不宜長(cháng)期與之接觸；裝在液相色譜儀上的色譜柱如不經(jīng)常使用，應每隔4-5天開(kāi)機沖洗15分鐘。